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ELISA試劑盒抗體的方法測定
更新時(shí)間:2016-02-03   點(diǎn)擊次數(shù):975次

     ELISA試劑盒技術(shù)20世紀(jì)80年代引入中國,現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用。與之相關(guān)的分析儀器也得到了快速發(fā)展,我國先后出現(xiàn)了十余家酶標(biāo)儀、洗板機(jī)生產(chǎn)廠商,在中國市場上與眾多的進(jìn)口酶標(biāo)儀器進(jìn)行緊張競爭。下面分三個(gè)方面對中有關(guān)儀器及其在中國的應(yīng)用作一簡要介紹。 其他基質(zhì)不能使用。

血清和血漿中總蛋白和鹽的濃度相當(dāng)穩(wěn)定,但尿液中鹽濃度則變化較大,鹽濃度增加對抗原抗體間反應(yīng)起一個(gè)抑制作用。 ELISA試劑盒如果樣本體積小于總反應(yīng)體積的10%~15%,則蛋白的影響不明顯,但有時(shí)為提高測定的敏感性,常需一個(gè)較大的樣本體積。因此,要求參考方法具有低的測定下限,且樣本體積對總反應(yīng)體積應(yīng)小至足以排除大部分基質(zhì)效應(yīng)。

樣本中的免疫球蛋白可通過與測定中所使用的特異抗體發(fā)生反應(yīng)而影響測定結(jié)果。如自身免疫病患者常有可與抗體反應(yīng)的類風(fēng)濕因子(RF)針對動(dòng)物免疫球蛋白的嗜異性天然抗體相當(dāng)普遍,但一般情況下其濃度和親和力較低。自身抗體和嗜異性天然抗體的存在通常會(huì)引起假陽性反應(yīng)。這些干擾可通過加入足量的來自同一種系的免疫球蛋白而減小,也可在測定中使用抗體的Fab或 ELISA試劑盒2片段替代完整抗體來減小干擾,但如果樣本含有針對試劑抗體的個(gè)體基因型(idiotype)抗體,則這種方法無效。這種情況下只有將免疫球蛋白從樣本中去除或使用一個(gè)依據(jù)另一個(gè)抗體的方法測定。

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